所謂“雜菌”， 是指在發(fā)酵培養(yǎng)中侵入了有礙生產(chǎn)的其他微生物。幾乎所有的發(fā)酵工業(yè)，都有可能遭受雜菌的污染。染菌的結(jié)果，輕者影響產(chǎn)量或產(chǎn)品質(zhì)量，重者可能導(dǎo)致倒罐，甚至停產(chǎn)。因此發(fā)酵罐滅菌過(guò)程中要注意以下幾點(diǎn)事項(xiàng)： 

1、蒸汽和滅菌操作        

罐壓1公升/厘米2，料溫120℃并維持一定時(shí)間是一般實(shí)罐滅菌(即培養(yǎng)基的分批滅菌)的操作規(guī)范。根據(jù)操作經(jīng)驗(yàn)，能否達(dá)到徹底滅菌的目的在于罐內(nèi)壓力能否控制得與應(yīng)該達(dá)到的溫度相對(duì)應(yīng)，例如罐壓已達(dá)到1公斤/厘米2而料溫卻并未達(dá)到120℃，則某些耐熱的細(xì)菌芽孢就難以完全殺死。產(chǎn)生罐壓和料溫不相對(duì)應(yīng)的情況是由于操作不合理所致，例如在滅菌開(kāi)始時(shí)沒(méi)有將罐內(nèi)冷空氣排除干凈，蒸汽中摻入了冷空氣使蒸汽的分壓降低，蒸汽壓力實(shí)際上沒(méi)有達(dá)到1公斤/厘米2因而料溫也就達(dá)不到120℃。       

為了加快加熱時(shí)間，凡能進(jìn)蒸汽的管路在滅菌時(shí)都可同時(shí)進(jìn)汽，但各管路的阻力不同，大量蒸汽從阻力小的進(jìn)汽管中沖入罐內(nèi)，這是一種蒸汽短路現(xiàn)象，使物料受熱不勻，部分培養(yǎng)液過(guò)熱而部分培養(yǎng)液則可能滅菌不透，尤其是罐底的空氣分布管是主要的進(jìn)汽口，但由于液柱壓力較大，阻力就比其他進(jìn)口大，所以在滅菌操作時(shí)應(yīng)將空氣分布管的進(jìn)口閥門(mén)開(kāi)得比其他進(jìn)氣口的閥門(mén)大一些，以保證有足夠的蒸汽從空氣分布管進(jìn)入，促使培養(yǎng)液激烈翻動(dòng)起攪拌混和作用。     

滅菌蒸汽要求采用飽和蒸汽，冷凝水越少越好，冷凝水多，熱量的穿透力就差，在冷凝水較多或蒸汽管道較長(zhǎng)的情況下，蒸汽進(jìn)車間后的總管上要裝設(shè)汽水分離裝置將冷凝水分離后再使用�？傊�，滅菌時(shí)蒸汽壓力要求平穩(wěn)，在壓力變動(dòng)較大時(shí)，操作人員需靈活掌握加以控制。 

2、泡沫問(wèn)題        

實(shí)踐證明：滅菌時(shí)泡沫嚴(yán)重的，就不易滅透。所以在發(fā)生泡沫時(shí)應(yīng)加以清除(加消泡劑和在操作上予以控制)。    

發(fā)生泡沫的培養(yǎng)基滅菌不透的原因可能是由于某些耐熱細(xì)菌潛伏在泡沫里，泡沫中的空氣和泡沫的薄膜有隔熱作用，熱量不易穿透進(jìn)去殺死其中潛伏的菌，一旦泡沫破裂，這些菌就被釋出造成污染。 

3、其他操作問(wèn)題       

實(shí)罐滅菌時(shí)，當(dāng)經(jīng)過(guò)加熱和維持時(shí)間后開(kāi)始冷卻，此時(shí)可能因蒸汽冷凝而使罐壓突然降低甚至?xí)�形成真��，所以此時(shí)必須將無(wú)菌空氣通入罐內(nèi)保持一定壓力，并注意壓力變化，隨時(shí)進(jìn)行調(diào)節(jié)。       

對(duì)于中小型發(fā)酵罐，一般經(jīng)空罐滅菌(1.5公斤/厘米2，15分鐘)后再將培養(yǎng)基放入罐內(nèi)進(jìn)行實(shí)罐滅菌。有些工廠為了節(jié)約蒸汽，直接進(jìn)行實(shí)罐滅菌而不進(jìn)行空罐滅菌，他們只有在檢修后或在節(jié)日停工后以及春夏季節(jié)發(fā)酵罐空置了24小時(shí)以上時(shí)才進(jìn)行空罐滅菌。這種方法如果操作上注意是完全可行的，也是一種節(jié)約燃料的有效措施。     

 

 

大型發(fā)酵罐大多采用連續(xù)滅菌，這時(shí)空罐需先行滅菌。但也有在發(fā)酵完畢后，將空罐保壓不滅菌就進(jìn)連消好的培養(yǎng)基，這要根據(jù)各廠的生產(chǎn)菌株特性和生產(chǎn)設(shè)備等具體情況而定。對(duì)于發(fā)酵周期短的菌株、突變影響小的發(fā)酵，采用保壓不進(jìn)行空罐滅菌的辦法是可行的，但經(jīng)一定發(fā)酵批數(shù)后仍需定期進(jìn)行空罐滅菌，否則較難避免雜茵污染與遺傳突變的影響。